転写制御遺伝子スプライスバリアントのPDI解析

 2.2において示したように本研究で用いたFosスプライスバリアントはPDI領域の全域 を欠く.従ってDNAとの結合にON/OFFの変化が確認されると予想された.本解析にお いてFosはJunとヘテロダイマーを構成しDNAと結合することからプルダウン法を利用 しDNAに対して蛍光標識したFosおよびそのアイソフォームとJunの結合能力を検証した (図4).

図4 (以下、図の説明)
 プルダウン法を用いFos・JunへテロダイマーのDNAに対する結合性を検証した. 尚,PDI変化についてはアビジンビーズと結合するAP-1結合領域を有するビオチン付 DNAに対して結合したFos・Junのヘテロダイマーについてタンパク質の分子量と蛍光 標識による確認を行った.

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